濾膜法利用一種具有微孔的濾膜(多孔性的硝化纖維薄膜或乙酸纖維薄膜,與細(xì)菌濾器配套使用),用抽濾方法使水中的細(xì)菌截留在濾膜上,然后置于特制的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以菌落特征、鏡檢、乳糖發(fā)酵鑒定濾膜上生長的典型大腸菌群菌落。最后對(duì)濾膜上生長的總大腸菌群數(shù)以每100mL水樣中的總大腸菌群數(shù)報(bào)告之(CFU/100mL)。例如,每50mL水樣過濾1張濾膜共過濾2張濾膜,其中1張濾膜上生長的大腸菌群菌落數(shù)為20,另一張為15,則結(jié)果報(bào)告為(20+15)*100/(50+50)=35CFU/100mL。
濾膜法的主要步驟如下:
1、將濾膜裝在細(xì)菌濾器(圖7.7)上,用抽濾過濾定量的水樣,使細(xì)菌截留在濾膜表面;
2、將此濾膜無菌的一面覆在品紅亞硫酸鈉或伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)24h,以培育獲得單個(gè)菌落;
3、對(duì)濾膜上符合大腸菌群菌落特征的菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢;
4、將革蘭氏染色陰性無芽孢桿菌的菌落接種到乳糖持養(yǎng)基中,根據(jù)產(chǎn)氣與否判斷大腸菌群的存在。
多管發(fā)酵法使用歷史較久,適用于各種水樣,是水的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)分析法,但完成全部檢驗(yàn)需要72h。濾膜法是一種快速的替代法,而且結(jié)果重復(fù)性好,操作簡便,能測定大體積的水樣,為我國大多數(shù)水廠和衛(wèi)生單位所采用。但若水中雜質(zhì)太多則易堵塞濾孔,所以濾膜法僅適用于水質(zhì)濁度低的水樣。