(1)、無菌水的制備

　　在小號試管內(nèi)盛9mL自來水，塞好硅膠塞，包扎以后經(jīng)高壓蒸汽滅菌后備用。無菌水常用于稀釋水樣。

　　(2)、滅菌

　　1)、干燥滅菌(熱空氣滅菌法)

　?、賹b好的待滅菌物品(培養(yǎng)皿、移液管等)放入干燥箱內(nèi)。不要擺得太擠。

　?、陉P(guān)箱門，插上電源，啟動開關(guān)，旋動恒熱調(diào)節(jié)器至160℃。

　?、?60℃恒溫2h(由恒熱調(diào)節(jié)器自動控制)。注意不超過170℃，以免包裝紙被烤焦。

　?、?h后切斷電源，待溫度降至70℃以下，才能開箱門取出滅菌物品。

　　2)、高壓蒸汽滅菌法

　　①打開滅菌鍋蓋，向鍋內(nèi)加入適量的水，或從加水口處加水。

　　②將待滅菌的培養(yǎng)基和自來水放入鍋內(nèi)，不要太擠或緊靠鍋壁，以免影響蒸汽的流通和冷凝水順壁流入物品中，加蓋旋緊螺旋，密閉。

　?、鄞蜷_排氣閥，加熱，自開始產(chǎn)生蒸汽后約10min再關(guān)緊排氣閥，此時蒸汽已將鍋內(nèi)的冷空氣由排氣孔排盡。若鍋內(nèi)冷空氣未排盡，則達不到應(yīng)有的溫度，結(jié)果造成滅菌不徹底。

　?、艽龎毫χ饾u上升到所需壓力時，開始計算滅菌時間，并控制熱源，維持所需壓力，以98.1kPa的壓力、溫度121℃滅菌15min。

　?、轀缇鷷r間到達后，停止加熱。

　?、薮龎毫Ρ碇羔樈档健?”時，打開排氣閥。注意切勿過早打開，否則可因驟然減壓降溫造成滅菌液體外溢和玻璃破碎。

　?、叽艢饪谉o蒸汽排出，方可開鍋蓋，取出滅菌物品，將鍋內(nèi)剩余的水放掉。

　　另外，含糖培養(yǎng)基一般是控制在65.7kPa(112℃)的壓力，滅菌30min，以防高溫破壞培養(yǎng)基的成分。