水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)主要包括兩個(gè)常規(guī)項(xiàng)目:(1)水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定;(2)水中總大腸菌群的測(cè)定。
對(duì)水樣進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)時(shí),必須嚴(yán)格注意一下細(xì)節(jié):
1)水樣必須收集在經(jīng)過預(yù)先滅菌處理的采樣瓶中,并保證在采集、運(yùn)送、保存過程中不受污染。
2)水樣在采集后應(yīng)盡可能迅速檢驗(yàn),若需推遲檢驗(yàn),應(yīng)貯藏在0-10℃的溫度下(通常是貯藏于4℃的冰箱),保持時(shí)間不得超過4h。
3)所取水樣必須能夠代表該水質(zhì)。
4)自來水、深井水等清潔水,可直接用于檢驗(yàn);水源水及生活污水一般要稀釋后才能用于檢驗(yàn)。稀釋倍數(shù)視水的污染程度而定。
5)細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)需要在同等條件下作空白對(duì)照培養(yǎng)。
水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定——平板計(jì)數(shù)法
水中的細(xì)菌種類繁多,各種細(xì)菌的生理特性不完全一致。沒有任何一種單獨(dú)的培養(yǎng)基能滿足水中所有細(xì)菌的營養(yǎng)要求,但大多數(shù)細(xì)菌在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上生長良好。因此,水中細(xì)菌總數(shù)是指1mL水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上于37℃培養(yǎng)24h后生長的細(xì)菌菌落總數(shù),所得結(jié)果只包括一群能在營養(yǎng)瓊脂上發(fā)育的嗜中溫的需氧的細(xì)菌菌落總數(shù)。在37℃下培養(yǎng)的細(xì)菌,可代表在人的體溫下可繁殖的腐生細(xì)菌,其衛(wèi)生意義相對(duì)較大。但水中細(xì)菌總數(shù)主要是作為水被細(xì)菌污染程度的指標(biāo),不能說明污染的來源,因此必須結(jié)合大腸菌群數(shù)來判斷水污染的來源和安全程度。
采用平板計(jì)數(shù)技術(shù)測(cè)定水中的細(xì)菌總數(shù),是將水樣接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上,于37℃培養(yǎng)24h,在培養(yǎng)基表面會(huì)生長出肉眼可見的菌落。每個(gè)獨(dú)立的菌落可代表培養(yǎng)前水中的一個(gè)細(xì)菌。通過菌落計(jì)數(shù)和計(jì)算,報(bào)告每毫升原水樣中的細(xì)菌總數(shù)。鑒于水中的細(xì)菌細(xì)胞是以單個(gè)、成雙、成鏈或成堆的形式存在,因而在營養(yǎng)瓊脂平板上出現(xiàn)的菌落可以來源于細(xì)胞塊也可來源于單個(gè)細(xì)胞,故而平板上生長的菌落數(shù)應(yīng)以單位容量中的菌落形成單位數(shù)(Colony Forming Units CFU)報(bào)告,即CFU/mL。