1、測(cè)量?jī)x器 常用檢流計(jì)或電位計(jì)。

　　目前使用較普遍的分光光度計(jì)為72型、721型和751型以及7230型。

　　721型分光光度計(jì)波長(zhǎng)范圍360-800nm。其光學(xué)系統(tǒng)如圖6.13所示。

　　由光源發(fā)出的可見(jiàn)光射到聚光透鏡上，經(jīng)平面鏡轉(zhuǎn)角90°，通過(guò)入射狹縫到準(zhǔn)直鏡。準(zhǔn)直鏡是一塊圓形凹面反射鏡，光線在準(zhǔn)直鏡上反射后，就以一束平行光射向棱鏡，棱鏡的背面鍍鉛，經(jīng)棱鏡色散后的光在鋁面上反射再回到準(zhǔn)直鏡，再經(jīng)準(zhǔn)直鏡反射后聚在出口狹縫上，在出光狹縫后得到一定波長(zhǎng)的單色光。單色光通過(guò)液槽和光量調(diào)節(jié)器，射到真空光電管上轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)，經(jīng)放大器放大后，在檢流計(jì)上直接讀出吸光度百分透光度。

　　751型分光光度計(jì)波長(zhǎng)范圍200-1000nm，即從紫外區(qū)到近紅外區(qū)。其光學(xué)系統(tǒng)如圖6.14。此儀器有氫燈和鎢絲燈兩種光源。在波長(zhǎng)200-320nm范圍內(nèi)用氫燈;在波長(zhǎng)320-1000nm范圍內(nèi)用鎢絲燈。以石英棱鏡作為單色器。用光電管作接受元件，配有紫敏光電管和紅敏光電管兩種。前者適用于波長(zhǎng)200-625nm范圍，后者適用于625-1000nm范圍。此儀器配有玻璃和石英兩種液槽，分別適用于可見(jiàn)光區(qū)和紫外光區(qū)。

　　2、定量方法

　　主要應(yīng)用工作曲線法(標(biāo)準(zhǔn)曲線法)作分光光度法的定量方法、根據(jù)物質(zhì)對(duì)光選擇吸收的性質(zhì)，先測(cè)出該物質(zhì)的吸收曲線，以求得合適的入射光波長(zhǎng)λ。然后，根據(jù)朗伯-比爾定律，以溶液濃度與吸光度的直線關(guān)系作工作曲線。為此，用已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作標(biāo)準(zhǔn)系列，其濃度依次為c1，c2，c3，c4…，由小到大。在λ波長(zhǎng)照射下，測(cè)得相應(yīng)的吸光度A1，A2，A3，A4…，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，作出工作曲線。最后將待測(cè)溶液在λ波長(zhǎng)下測(cè)出吸光度Ax，在工作曲線上查出cx。