（1）乳糖發(fā)酵試驗 該試驗根據(jù)大腸菌群能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的生化特性來進行。將水樣接種于含乳糖的液體培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24h后，觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況，若產(chǎn)酸產(chǎn)氣則為陽性反應(yīng)。由于水中除大腸菌群外，還有一些也能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的非大腸菌群細菌，因此陽性反應(yīng)只能推測大腸菌群存在的可能性，需要進一步做確定試驗。

　?。?）分離培養(yǎng) 該試驗包括鑒別和鏡檢兩部分，是根據(jù)大腸菌群在鑒別培養(yǎng)基上生長并形成典型菌落、革蘭氏染色陰性和無芽孢的特征來進行的。將推測試驗中呈陽性反應(yīng)的菌液接種于伊紅美藍培養(yǎng)基或遠藤氏培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能抑制非大腸菌群細菌的生長，而有利于大腸菌群的生長并形成典型特征的菌落。大腸菌群在伊紅美藍培養(yǎng)基上的典型菌落特征是：①深紫黑色，具有金屬光澤;②紫黑色，不帶或略帶金屬光澤;③邊緣淡紫紅色，中心深紫色。大腸菌群在遠藤氏培養(yǎng)基上典型的菌落特征是：①紫紅色，具有金屬光澤;②深紅色，不帶或略帶金屬光澤;③邊緣淡紅色，中心深紅色。

　　接種于上述培養(yǎng)基上的細菌37℃培養(yǎng)24h后，若有大腸菌群典型菌落形成，則對典型菌落的細菌進行革蘭氏染色，經(jīng)鏡檢證實為甘蘭氏染色陰性無芽孢桿菌，可初步確定有大腸菌群存在，但還要作驗證試驗。

　?。?）證實試驗 該試驗主要驗證革蘭氏陰性無芽孢桿菌能否使乳糖發(fā)酵并產(chǎn)酸產(chǎn)氣。從確定試驗中選取一些證實為甘蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌落，接種于乳糖液體培養(yǎng)基中，經(jīng)37℃培養(yǎng)24h。若產(chǎn)酸產(chǎn)氣，即證實有大腸菌群存在。

　　根據(jù)證實為總大腸菌群陽性的管數(shù)查MPN檢索表，報告每100mL，水樣中的總大腸菌群MPN值。如所有乳糖發(fā)酵管均陰性時可報告未檢出總大腸菌群。