1.水質(zhì)監(jiān)測中-培養(yǎng)基的制備與滅菌操作練習實驗目的:
(1)、學會滅菌前的準備工作。
(2)、掌握培養(yǎng)基和無菌水的制備方法。
(3)、掌握幾種常用的滅菌方法和高壓蒸汽滅菌技術(shù)。
2.實驗原理:
培養(yǎng)基是以微生物生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì),用人工方法配制而成的。其中含有水分、碳源、氮源、無機鹽以及維生素等。用HCl溶液或NaOH溶液調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值,以保證微生物在最適宜的酸堿度范圍內(nèi)表現(xiàn)它們最大的生命活力并生長繁殖。
滅菌是水質(zhì)檢驗實驗的基本技術(shù)之一。所謂滅菌,即指殺死一切微生物的細胞及芽孢或孢子。滅菌時利用高溫,使菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)發(fā)生凝固變性,從而殺死微生物,利用此原理可以去除物品上的一切細菌,達到無菌的目的。滅菌的方法很多,一般玻璃器皿可用干熱滅菌,培養(yǎng)基采用濕熱滅菌,無菌室或無菌箱可用紫外線消毒。本實驗以高壓蒸汽滅菌法給培養(yǎng)基滅菌,用干燥滅菌法給玻璃儀器滅菌。
3.實驗試劑:
(1)、牛肉膏、蛋白胨、氧化鈉、瓊脂;
(2)、10%HCl溶液、10%NaOH溶液、蒸餾水;
(3)、精密pH試紙。
4.實驗儀器與設(shè)備:
(1)、大、中、小號試管各4支、10mL刻度移液管1支、250mL燒杯、錐形瓶各1個。
(2)、培養(yǎng)皿4套、1mL移液管4支、量筒、玻棒。
(3)、托盤天平、酒精燈、三角架、石棉網(wǎng)、漏斗架、漏斗、帶彈簧夾的橡皮管、玻璃導管。
(4)、紗布、棉花(未脫脂)、舊報紙、細鐵絲、剪刀、細繩、標簽紙、硅膠塞。
(5)、高壓蒸汽滅菌鍋、干燥箱、培養(yǎng)箱、電冰箱、電爐。