水質(zhì)監(jiān)測中實(shí)驗(yàn)6-培養(yǎng)基的制備與滅菌操作練習(xí)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟

　　(1)、常用玻璃器皿的包裝與滅菌

　　1)、將洗滌干凈并晾干的培養(yǎng)皿按實(shí)驗(yàn)所需套數(shù)用牛皮紙包裝。

　　2)、移液管的吸端用鋼絲塞入少許棉花，成為長1-1.5cm的面塞(以防止細(xì)菌吸入口中，也避免將口中細(xì)菌吹入管內(nèi))，棉花要塞得松緊適宜，吸時既能通氣又不致使棉花滑動。用4-5min寬的長紙條從移液管的尖端開始緊緊將移液管全部包裹起來，余下的紙頭折疊打結(jié)，如實(shí)驗(yàn)圖1所示。按照實(shí)驗(yàn)需要，可單支或多支包裝。

　　(2)、培養(yǎng)基的制備

　　1)、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配方

　　牛肉膏：0.3-0.5g        瓊脂：1.5-2g        蛋白胨：1.5g

　　蒸餾水：100mL           NaCl：0.5g          pH：7.4-7.6

　　2)、制備步驟

　?、僬{(diào)配   按培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱取各成分，置于燒杯中，用少量水溶解。

　?、谌芑?  各成分混勻于水中加熱溶化，注意隨時攪拌并防止外溢，溶化完畢，要補(bǔ)足失去的水分。

　?、壅{(diào)整pH值   調(diào)節(jié)pH值在6.8-7.2之間，但在高壓滅菌后，pH值約降低0.1-0.2，故校正時應(yīng)比實(shí)際需要的pH值高0.1-0.2(除非特殊需要，最好不要用有機(jī)酸來調(diào)節(jié)pH值)。

　　④過濾   用紗布或?yàn)V紙過濾。若培養(yǎng)基雜質(zhì)很少或?qū)嶒?yàn)要求不高，可不過濾。

　?、莘盅b   根據(jù)需要將培養(yǎng)基分裝于不同容量的錐形瓶和試管中，分裝量不宜超過容器的2/3，以免滅菌時外溢。其中，中號試管每管分裝量約為管高的1/5，滅菌后制成斜面培養(yǎng)基；大號試管每管分裝量為15mL，滅菌后以備制作平板；其余全部傾入250mL錐形瓶，滅菌后以備制作平板。

　?、薨b   塞好硅膠塞并包扎。錐形瓶單獨(dú)包扎，試管可以多支一齊包扎。包扎前要貼上標(biāo)簽，標(biāo)簽上寫明培養(yǎng)基名稱和配制日期。

　?、邷缇?  溫度121℃壓力98.1kPa高壓蒸汽滅菌15min(不宜高壓蒸汽滅菌的糖類培養(yǎng)基可降低溫度、延長滅菌時間，或用濾膜過濾滅菌)。

　?、酂o菌檢驗(yàn)   取其中1-2支試管與培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)24h，證實(shí)無菌；同時再用已知菌種檢查在此培養(yǎng)基上的生長情況，符合要求方可用。